1、先檢查樣品是否過載
由于樣品過載引起的峰形后拖不能通過改變色譜條件消 除。如果發(fā)現(xiàn)過載，需降 低進(jìn)樣量（包括進(jìn)樣體積或濃度），進(jìn)樣量越小，峰形越好，例子如頭孢尼西鈉的測定：
2、調(diào)節(jié)流動相pH
將流動相的pH調(diào)至比弱酸p Ka小2以上，比弱堿p Ka大2以上，可有 效抑 制易離子化待測物的電離，從而取得良好峰形。例子如二甲基苯氧乙酸的測定：
 堿性化合物中，甲胺的p Ka為10.64，那么在pH< 8.64的時(shí)候它是完 全呈離子態(tài)的， 那么pH在2.5~8.64時(shí)，特 別是pH6.7～8.64時(shí)，此時(shí)甲胺和硅羥基均以離子狀態(tài)－NH3＋和Si－O－形式存在的，它們之間相互吸引的靜電作用導(dǎo)致后拖，這就是為什么很多堿性化合物在pH 7.0的條件下容易產(chǎn)生拖尾的原因。而很多色譜柱生產(chǎn)商也因此以阿米替林（含－N(CH3)2，堿性比－NH2強(qiáng)）在pH 7.0的條件下來評價(jià)和比較不同色譜柱之間的優(yōu)劣，該條件下的阿米替林的峰形越好說明封尾越好。而在pH
3、增加緩沖鹽或增 大緩沖鹽的濃度
 流動相中加入緩沖鹽，增 強(qiáng)了流動相的離子強(qiáng)度，在－NH3＋等及性基團(tuán)和硅羥基Si－O－之間存在著許多離子的干擾，減少了樣品分子與硅羥基之間相互接觸的機(jī)會，有 助于削弱及性基團(tuán)與硅羥基之間的相互作用，改 善峰形。這種適合于堿性較弱（如氨基的N原子與強(qiáng)吸電子基相連），或堿性很強(qiáng)，但在剛性結(jié)構(gòu)中，比較難 以接近被C18長鏈和封尾試劑覆蓋的硅羥基，例子如高烏甲素的測定：
4、加入三乙胺、四丁基硫酸氫銨或辛烷磺酸鈉
拖尾的產(chǎn)生是因?yàn)椋璑H2、－NHR、－NR2與硅羥基發(fā)生靜電作用引起的，那么阻 礙它們之間靜電作用的途徑，應(yīng)該有兩種，一種是占據(jù)硅羥基這個(gè)作用位點(diǎn)，另一種是占據(jù)－NH2、－NHR、－NR2這個(gè)作用位點(diǎn)。
在流動相中加入三乙胺，能顯 著的改 善峰形，消 除拖尾，其作用是屏蔽硅羥基。三乙胺的p Ka為11.09，在pH<11.09－2＝9.09的條件下是以離子狀態(tài)N＋H(CH2CH3)3的形式存在的，因此pH在2.5~8.64 硅羥基呈Si－O－離子態(tài)的情況下，N＋H(CH2CH3)3容易與Si－O－形成相對較強(qiáng)的靜電吸引力。
加入三乙胺改 善峰形的時(shí)候，有兩點(diǎn)需要注意：1）三乙胺的堿性很強(qiáng)，加入三乙胺后流動相的pH可能操出 色譜柱的使用范圍，對色譜柱造成損商。pH的改變也會導(dǎo)致出峰時(shí)間的顯 著變化，可能引起的其它問題，建議流動相中加入三乙胺后回調(diào)至未加入前的pH值。通常即使pH回調(diào)過后，由于三乙胺成為了固定相的一部分，保留時(shí)間也有較大變化；2）三乙胺在210nm處有比較強(qiáng)的吸收，如果液相方法中檢測波長在210nm以下測定時(shí)需要謹(jǐn)慎使用。
四烷基季銨鹽（如四丁基硫酸氫銨、四丁基溴化銨、四丁基氫氧化銨等）在水中電離后，也形成了類似N＋H(CH2CH3)3的結(jié)構(gòu)N＋(CH2CH2CH2CH3)4 ，這種結(jié)構(gòu)也能有 效的與Si－O－產(chǎn)生較強(qiáng)的靜電作用，阻止氨基與硅羥基的接觸，改 善峰形。而且它還有一個(gè)不同于三乙胺的顯 著特點(diǎn)是，它在低波長范圍的吸收比三乙胺弱。
流動相中加入辛烷磺酸鈉等烷基磺酸鹽離子對試劑也能很 好的改 善峰形，其作用機(jī)理與三乙胺和四丁基硫酸氫銨頗為不同，是通過與樣品分子的作用來阻止樣品分子與硅羥基的作用來改 善峰形。