譜析分享 自動頂空進樣-氣相色譜法開發(fā)出新應用 厭氧菌活性檢測
我們每天都生活在被細菌包圍的世界里。不僅日常環(huán)境中時時刻刻都接觸到細菌，就連人體的皮膚表面和身體內(nèi)部特別是消化系統(tǒng)中也寄居著數(shù)以萬億計的細菌。其中多數(shù)是厭氧菌。正常情況下，這些細菌對人體無害，甚至對人體生長發(fā)育和身體健康有著不可缺少的作用。但是一旦皮膚、粘膜屏障功能減退或者菌群移位引起菌群失衡，厭氧菌就會引發(fā)感染，對健康造成危害。
厭氧菌幾乎可以感染所有的組織器官，導致口腔感染、闌尾炎、中耳炎、骨髓炎還有敗血癥、破傷風等多種疾病，有些疾病還會危及生命。針對厭氧菌感染的主要治療方式是廣譜抗菌療法，即利用廣譜抗生素，如青霉素、阿莫西林、氧氟沙星等進行治療。
隨著厭氧菌的耐藥性越來越強，基于經(jīng)驗的傳統(tǒng)廣譜抗菌療法的適用性已經(jīng)開始變得越來越低，經(jīng)常出現(xiàn)臨床治療失敗的情況。為了解決這一問題就需要建立基于試驗和檢測的抗厭氧菌藥物藥效評價方法，準確判斷藥物的抗厭氧活性。然而厭氧菌的培育需要低氧或者無氧的環(huán)境，而且厭氧菌生長緩慢，因此候選藥物的抗厭氧試驗往往成本很高而且效果不佳。
近日，武漢植物園的研究團隊開發(fā)了一種利用頂空-氣相色譜法（HS-GC-TCD）測定候選藥物抗厭氧活性的新方法。這種方法利用厭氧菌代謝產(chǎn)生酸的特點，將培養(yǎng)基中的代謝酸度作為厭氧菌活性的測試指標。代謝酸與碳酸氫鈉反應，完全轉(zhuǎn)化為二氧化碳，然后用HS-GC-TCD檢測二氧化碳的含量。該方法對細胞活性反應更靈敏，可以極大地增加抗厭氧活性檢測的精度（相對標準偏差低于5%），而且可以減少交叉污染，適合于抗厭氧活性的多種藥物的常規(guī)篩選。
頂空-氣相色譜法又稱液上氣相色譜分析法，將頂空進樣器與氣相色譜儀相連。其中頂空進樣器可專一性收集樣品中的易揮發(fā)性成分或者萃取吸附氣體樣品然后直接導入氣相色譜儀進行分離和檢測，簡單實用。頂空-氣相色譜法目前已經(jīng)在環(huán)境檢測、食品、藥品中有機殘留溶劑檢測等方面有廣泛的應用。研究團隊開發(fā)出的新方法不僅為抗厭氧藥物提供了有效的藥效評價工具，也為頂空-氣相色譜法開拓了新的應用領域。
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