中醫(yī)是我國傳統(tǒng)文化的瑰寶,中藥材質(zhì)量的好壞直接影響到中成藥的質(zhì)量安全與臨床療效。藥品檢驗工作是確保藥品安全以及藥物療效的重要措施。氣相色譜儀、液相色譜儀、薄層色譜儀等色譜技術(shù)是當前中藥檢驗中的一種有效手段,在定量定性分析中藥材方面發(fā)揮著積極的作用。因此,山東譜析儀器色譜工程師就色譜技術(shù)在中藥檢驗中的應用進行簡單的綜述,以供參考。
在醫(yī)療改革新形勢下,中藥的安全性日漸成為醫(yī)學界關(guān)注的重點問題,開展科學有效的中藥檢測工作意義重大?,F(xiàn)階段,我國色譜研究工作進展迅速,分離、檢測等技術(shù)方面取得了巨大進步,檢測系統(tǒng)自動化分析和微量檢測等性能日漸成熟,在研究與創(chuàng)新過程中形成了一種全新的儀器分析技術(shù),能夠有效提高檢測工作效率和質(zhì)量,進而保證中藥的安全性,為合理有效用藥奠定了堅實的基礎(chǔ)。
1 、氣相色譜技術(shù)的應用
在揮發(fā)性中藥成分檢測過程中,氣相色譜技術(shù)發(fā)揮著重要的作用,有研究結(jié)果顯示,氣相色譜能夠有效解決有機溶液提取不充分的問題,將其應用于珍貴藥材或者微量成分分析過程中意義重大。以直接蒸發(fā)氣相色譜技術(shù)為例,其能夠運用少量樣本實施檢測,通常選取1~2 mg即可,處理過程中將樣本放置在容器內(nèi),加熱數(shù)分鐘后便可獲取到氣體,避免出現(xiàn)樣品浪費現(xiàn)象。同時相關(guān)研究結(jié)果顯示,氣相色譜技術(shù)還可和其他技術(shù)相結(jié)合,以此達到良好的檢測效果,例如在順反異構(gòu)體檢測過程中,可在氣相色譜檢測中,使用傅里葉變換紅外檢測儀,通過毛細管進行分離,利用氣體收集光管存放分離得到的組分,將各個組分對應的氣相光譜視為分析數(shù)據(jù),并將其轉(zhuǎn)換為傅里葉干涉圖譜,并以數(shù)據(jù)庫內(nèi)的紅外光譜圖為參照,將二者進行鑒定對比。
2、 高效液相色譜儀在中藥分析中的應用
當前研究結(jié)果表明,傳統(tǒng)中藥檢測多使用 高效液相色譜儀紫外線檢測儀器,但是僅適用于能夠吸收紫外線的物質(zhì)成分,檢測具有較大的局限性,因此在具體工作開展中應注重先進儀器的引入,進而提高檢測工作的有效性。其中高效液相色譜儀蒸發(fā)光散檢測器優(yōu)勢明顯,其適用于所有非揮發(fā)性中藥檢測,在檢測中聯(lián)合使用高效液相色譜分析技術(shù),能夠進一步擴大檢測范圍,對多種有機大分子物質(zhì)進行有效鑒定,并在復雜重要成分分析過程中具有顯著優(yōu)勢。有研究結(jié)果顯示,在西洋參皂苷元含量檢測過程中,工作人員運用了蒸發(fā)光散射檢測器,先對經(jīng)由色譜分離柱分離的組分進行霧化操作,以此生成霧化顆粒,將其與蒸發(fā)器中的溶液進行混合,利用光束進行照射,當光束照射到顆粒后會出現(xiàn)散射現(xiàn)象,工作人員收集熒光信號。在本次檢測中,在檢測前流動相已完成蒸發(fā),溶劑峰不會對檢測結(jié)果造成影響,從而保證梯度洗車基線平穩(wěn),提高了檢測的靈敏度,分離的準確性遠遠高于紫外檢測儀器。此外,在膽汁中膽酸種類及含量的檢測過程中,工作人員選取揮發(fā)性鹽,以此對流動相的pH進行調(diào)節(jié),洗脫梯度調(diào)節(jié)則選取甲醛水,對比后檢測結(jié)果十分精準。
3、薄層色譜在中藥分析中的應用
薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續(xù)的產(chǎn)生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。薄層色譜法應用廣泛,可用于化合物的鑒別和少量化合物的分離、用于檢測藥品含量、藥物合成中用于鑒別反應程度和監(jiān)控反應歷程、用于摸索高效液相的色譜條件等。
薄層色譜法在中藥分析方面的發(fā)展歷程:
薄層色譜法鑒別是在1985版中國藥典被首次收載的,但由于受到當時可獲得的化學對照品的缺乏故僅限于個別的專論中。實踐表明化學對照品的缺乏阻礙了薄層色譜法鑒別在草藥中應用的拓展。甚至一些多數(shù)草藥共同含有的化學對照品對于質(zhì)量評價來說是不太重要的。為了解決薄層色譜法鑒別中的瓶頸問題,對照藥材自1990版中國藥典起被引入了薄層色譜法鑒別項當中。眾所周知,薄層色譜法的獨一無二的優(yōu)勢是能夠提供類似圖畫的成像使得草藥中的成分組成能夠整體地被可視化。不同種屬的草藥產(chǎn)生的薄層色譜法圖像具有各自的專屬性。
薄層色譜在我國應用的現(xiàn)狀:
然而,目前我國大多數(shù)實驗室依然使用實驗室自制薄層板,同時多半使用的是簡陋的器材,操作粗放,長期處在“低水平,廣覆蓋”的狀態(tài)。我國在技術(shù)上一直滯留在初始階段的狀態(tài),逐漸與其他發(fā)達國家拉開了距離。
2015版藥典在薄層鑒別收載方面的特點:
薄層色譜法在復雜體系藥物的檢測方面應用越來越廣,且05版藥典在薄層鑒別收載方面呈現(xiàn)如下特點:
在已有的薄層鑒別中,2015版藥典增加了專屬性更強的藥材作對照。與對照品相比,本版藥典更強調(diào)使用對照藥材做鑒別,以增加整體專屬性,新增的513個薄層色譜法鑒別中,使用對照藥材的占61.6%;
增加對照品同時作對照,使鑒別更具針對性和專屬性。對照品和對照藥材同時使用,增強專屬性,空白不得有干擾;
將有較好專屬性的成分替換專屬性不佳的成分。
薄層色譜法有操作方便、設(shè)備簡單、顯色容易、速度快等特點,在我國中藥發(fā)展歷程中至關(guān)重要,已為中藥生產(chǎn)及質(zhì)量監(jiān)督管理部門所廣泛認同。隨著薄層色譜技術(shù)的不斷發(fā)展,它在中藥標準研究方面有更廣闊的前景。